ES-2細胞,人卵巢透明細胞癌細胞
細胞代號: |
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細胞名稱: | ES-2細胞,人卵巢透明細胞癌細胞
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組織來源: |
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對應疾病: |
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生長特性: |
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細胞來源: | 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進 | ||||||||||||||
培養(yǎng)條件: | 培養(yǎng)基: DMEM +10%FBS 氣相:空氣95%,二氧化碳5% 溫度:37℃ | ||||||||||||||
培養(yǎng): | 一、貼壁細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代; 2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,*次傳代比例為1:2。 3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(*次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為消化時間,記錄消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細胞,進行傳代。
二、懸浮細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清; 2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基,然后將其置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養(yǎng)基); 3.顯微鏡觀察細胞數(shù)目比較多時,對其進行傳代,*次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養(yǎng))。
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細胞總數(shù): | 1~3*106 | ||||||||||||||
傳代周期: | 2-3天 | ||||||||||||||
傳代比例: | 1:2~1:4 | ||||||||||||||
換液頻率: | 2-3天 | ||||||||||||||
凍存液: | 90%FBS+10%DMSO |
注意事項:
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2 瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力,并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。
4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片,記錄細胞狀態(tài),如細胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于一周內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態(tài)良好,不免費對后續(xù)細胞狀態(tài)問題進行售后。
5 因細胞產(chǎn)品的特殊性,如客戶對本公司細胞質(zhì)量存有疑問,請于收到細胞后1月內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,超過時間段,本公司則默認細胞質(zhì)量優(yōu)良,不承擔因細胞產(chǎn)生的任何責任。
Noverse細胞庫建立有標準化GMP細胞培養(yǎng)車間,保藏細胞種類2000余,從來源、引進、培養(yǎng)、凍存、復蘇、運輸,注重每一個環(huán)節(jié),提供活力強,代數(shù)靠前,優(yōu)質(zhì)細胞株細胞系。
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