Life AmnioMAX - II Complete Medium11269-016
【檢驗原理】通過穿刺術(shù)獲得羊水胎兒脫落細(xì)胞或絨毛膜細(xì)胞,使用該培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖后,提供后續(xù)檢測,如染色體核型分析。
【主要組成成分】基礎(chǔ)培養(yǎng)基、牛血清、谷氨酰胺、 抗生素。
【適應(yīng)范圍】羊水細(xì)胞及絨毛膜細(xì)胞體外增殖培養(yǎng)。
【儲存條件及有效期】
Life AmnioMAX - II Complete Medium11269-016
培養(yǎng)基應(yīng)貯存在-20℃,有效期為2年,溶解后應(yīng)存放于2-8℃,并于1周內(nèi)使用。 存放及使用時注意避光。
【生產(chǎn)日期與失效日期】詳見產(chǎn)品標(biāo)簽
【使用儀器】顯微鏡、二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱、離心機
【樣本要求】新鮮羊水細(xì)胞或絨毛膜細(xì)胞
【檢驗方法】
采用如下方法做羊水細(xì)胞原位培養(yǎng)或按其它常規(guī)羊水細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)羊水細(xì)胞:
1. 取羊水20ml, 以120xg離心十分鐘。
2. 在無菌操作臺操作,棄上清液.
3. 加入2ml羊水培養(yǎng)基,輕輕 混勻,制成細(xì)胞懸液。
4. 取35mm培養(yǎng)皿,在蓋子上面及下半部側(cè)壁都做好標(biāo)記(包括編號、姓名、日期等)。
5. 滴加0.5ml細(xì)胞懸液至培養(yǎng)皿中的蓋玻片(25px2)中央,用移液管尖小心攤開。注意液體不能流出蓋玻片。
6. 將培養(yǎng)皿置于5% CO2、濕度飽和的37度培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
7. 24小時后,給每塊蓋玻片補加1.5ml培養(yǎng)基。
8. 接種7天后觀察細(xì)胞。當(dāng)發(fā)現(xiàn)蓋玻片上細(xì)胞克隆數(shù)大于10個,每個克隆細(xì)胞數(shù)大于300且克隆邊沿細(xì)胞呈旺盛分裂狀態(tài)時,即可收獲細(xì)胞。否則,繼續(xù)培養(yǎng)1~2天。當(dāng)克隆邊沿細(xì)胞融合度大于90%,呈現(xiàn)停止分裂狀態(tài)時,意味細(xì)胞已經(jīng)老化,不適合用作分析。
9. 適合收獲的細(xì)胞按常規(guī)方法使細(xì)胞分裂停止在有絲分裂中期并制作細(xì)胞片,經(jīng)吉姆薩染色處理后做染色體核型分析。
【參考值(參考范圍)】細(xì)胞倍增指數(shù)大于2
【檢驗結(jié)果的解釋】細(xì)胞培養(yǎng)時間、加入秋水仙酰胺的量以及低滲操作時間對結(jié)果影響較大,如發(fā)現(xiàn)制片所得的分裂相較少,需要對實驗條件及樣品進(jìn)行確認(rèn)。
【檢驗方法的局限性】僅用于羊水細(xì)胞、絨毛膜細(xì)胞培養(yǎng)。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1. 裝量差異限度:±3%
2. 澄清度:澄清
3. PH值:7.0-7.5
4. 滲透壓(mOsm/kg):280-330
5. 無菌檢測:無菌
6. 內(nèi)毒素(EU/ml):<10
7. 細(xì)胞生長實驗:細(xì)胞倍增指數(shù)大于2
GIBCO羊水培養(yǎng)基是專門用于人羊水細(xì)胞培養(yǎng)的體外產(chǎn)前診斷試劑
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